[생물 임용 노트]원핵 생물 - 3) 그람 양성, 그람 음성

그람 염색법

• 과정
  1. 알코올램프로 2~3회 열처리하여 세균을 열 고정
  2. 염기성 염료인 크리스탈 바이올렛으로 1차 염색 후 물로 세척
  3. 매염제(I₂-KI 혼합) 처리 후 물로 세척(세포를 강하게 염색시키는 과정)
  4. 알코올이나 아세톤으로 탈색 후 물로 세척
  5. 염기성 염료 사프라닌으로 2차 염색 후 물로 세척
  6. 건조 후 현미경으로 검정
• 결론
  • 자색인 경우 → 그람 양성
  • 적색인 경우 → 그람 음성

세균

그람 양성 세균

• 두꺼운 펩티도글라이칸층을 갖고 있으며 외막이 없고, 많은 양의 테이콘산(teichoic acid)이 존재함
• TLR(면역 반응 관련 단백질 수용체)에 의해 인식되는 부위는 세포벽의 테이콘산 부위
• 세포벽이 알코올이나 아세톤에 의해 수축되어 크리스탈바이올렛-I₂ 복합체의 투과가 어려움
• 페니실린과 라이소자임에 대한 고감수성

그람 음성 세균

• 얇은 펩티도글라이칸 층(세포벽)
• 인지질, 지질 단백질, 단백질로 구성된 외막이 존재
• 외막이 존재하여 크리스탈바이올렛-I₂ 복합체가 투입되지 않음, 알코올에 의해 세포벽에 구멍이 생겨 용출이 일어남
• 페니실린과 라이소자임에 대한 감수성이 낮고, 외막이 이를 방어
• 외막의 지질 다당체나 편모가 TLR 인식 부위

고세균

• 그람 양성 고세균 : 유사 펩티도글라이칸, 유사 뮤레인을 가짐
• 그람 음성 : 세포막 외층에 당단백질이나 단백질로 된 세포벽이 존재