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목록유전자 재조합 과정 (1)
숭늉의 연구일지
[생물 임용 노트]유전자 클로닝과 실험기법 - 3) 유전자 재조합, 유전자 도서관
전반적 과정대장균에서 플라스미드 추출목적 유전자를 가진 DNA를 제한 효소로 절단제한 효소로 절단된 플라스미드와 목적 유전자 절편을 DNA ligase로 재조합재조합 플라스미드를 대장균에 형질 전환ampicilin과 X-gal이 첨가된 고체 배지에 배양재조합 플라스미드를 선별하여 액체배지에 대량으로 배양플라스미드 분리플라스미드를 갖는 단일 클론 대장균 colony를 영양 배지에 20hr 배양배양액을 원심 분리한 후 대장균을 수확(침전물)대장균 용액에 solution1(glucose, EDTA, Tris-HCl pH8.0) 첨가EDTA - Ca2+ 제거 + 세포벽 일부 파괴, glucose - 세포 용혈방지(삼투압 유지solution2(0.2N NaOH, 1% SDS) 첨가NaOH - 세포벽 파괴 및 DN..
생물학 임용노트/실험관련
2024. 8. 14. 15:46