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숭늉의 연구일지
[생물 임용 노트]돌연변이와 회복 - 4) 복귀 돌연변이 본문
진정 복귀 돌연변이(true reversion mutation)
돌연변이가 일어난 바로 그 자리가 돌연변이가 일어나 정상 표현형으로 돌아오는 경우이다.
억제 돌연변이(supressor mutation)
- intragenic supression : 돌연변이가 일어난 유전자 내부의 제 2의 자리가 돌연변이가 일어나 돌연변이가 억제되는 것을 말한다.
- intergenic supression : 한 유전자에서 일어난 돌연변이가 다른 유전자에서 일어난 돌연변이에 의해 억제되는 것을 말한다.
(그림 추가) - supressor tRNA : 종결 코돈과 반응하는 변화된 tRNA로 nonsense mutation을 억제한다. nonsense supressor tRNA라고도 한다.
- 종결 코돈을 억제하지만 항상 단백질의 원상 복귀는 어렵다.
- 단백질의 활성이 WT(wild type)보다 약할 수 있다.
- 종결 코돈이 sense 코돈으로 해석될 여지가 있다.
- 세포 내 정상적인 tRNA를 둘 또는 그 이상 가져야 생존이 가능하다.
- 이러한 종결의 문제점을 해결하기 위해서는 supressor tRNA보다 releasing factor가 효율적으로 인식하거나, 사슬 종결시 UGA-UAA같은 종결 코돈 쌍으로 존재하는 것이 필요하다.
Ames test
어느 물질이 돌연변이 유발성이 있는지 조사하는 방법으로, 영양 요구성 돌연변이를 그 물질 속에 배양한 뒤 복귀된 군체를 조사하는 것이다.
Ames test 예시>
- 대조군 배지 : His가 결여된 한천 배지
- 실험군 배지 : mutagen으로 생각되는 물질을 녹인 증류수를 적신 디스크를 배지 가운데에 놓은 배지
- 세균 : DNA 수복기작이 결여된 His 요구주 살모넬라균
- 배지에 his 요구성 살모넬라균을 접종한 후 2가지 실험을 실시
- 실험1 : mutagen 후보 물질을 적신 디스크를 실험군 배지의 중앙에 놓음
- 실험2 : 실험1에서 추가적으로 쥐의 간세포 추출물을 첨가
- 간세포 추출물의 기능 : 화합물이 대사 과정을 통해 강력한 돌연변이 유발을 일으킬 수 있기 때문에 넣어준다.
- 이후 37℃에서 배양한 후 복귀 돌연변이 군체(his+)를 조사한다.
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