[생물 임용 노트]단백질 정제와 정량 - 4) ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)

단백질 시료를 빠르게 확인하고 정량화하는 방법 중 하나이다.

실험 방법

1. 96-well 폴리스티렌 플레이트의 비활성 표면에 단백질 시료 부착 후 세척
2. 비점유 자리에 케이신을 채움
3. 검출하고자 하는 단백질에 대한 항체를 항온 처리
4. 세척 후 2차 항체 처리
5. 기질 첨가 후 발색시켜 강도를 측정하여 정량화

샌드위치 ELISA

결합 순서가 1차 항체 - 단백질 - 2차 항체(단백질에 대한) - 효소가 결합된 3차 항체 - 기질 첨가 순으로 하여 발색시킨 후 흡광도를 측정하는 방식이다.

면역 측정법(immunoassay)

항원을 항체가 결합된 라텍스에 처리해 항원-항체 반응을 일으켜 응집물을 형성 시켜 이들을 육안으로 확인할 수 있게 하는 방법이다.
대표적인 예시> 임신 키트; 오줌 속의 HCG를 항 HCG로 검출하는 방법