[생물 임용 노트]유전자 클로닝과 실험기법 - 2) 벡터

벡터(vector)

• 유전 물질을 전달하기 위해 전달 매개체로 사용되는 DNA 분자를 의미한다.
• 클로닝 벡터는 DNA 클로닝을 목적으로 하는 벡터, 유전자 발현 벡터는 유전자를 발현시키는 것을 목적으로 하는 벡터이다.

벡터의 조건

• cloning vector
  • 복제 원점을 가져야 한다.
  • 특정 유전자 재조합과 DNA 형질 전환 여부를 확인 가능한 선별 지표가 필요하다.
  • 숙주에 쉽게 들어가야한다.
  • 형질 전환이 쉽게 일어나야 한다.
  • 클로닝에 유리한 제한 효소 절단 부위가 존재해야 한다. → 하나 이상의 제한 자리 존재함.
  • MCS(multiple cloning site) : 여러 개의 제한 자리의 밀집 지역을 의미한다.
• 유전자 발현 벡터
  • 강력한 프로모터를 가져야 한다. 예> 대장균의 trp 프로모터
  • 효율적인 전사와 번역이 일어나야 한다.

벡터의 종류

• plasmid vector : 박테리아의 큰 플라스미드에서 유래한 작은 원형 DNA이다.
  • 예> pBR322 - 앰피실린(ampicilin)과 테트라사이클린(tetracyclin) 저항성 유전자를 가지며, 일부는 선별적 문제 개선을 위해 MCS가 존재하는 lacZ gene을 가지는 것도 존재한다.
• bacteriophage vector : 람다(λ) 염색체로부터 만들어진다. 유전체 중앙 부위를 제거하고 삽입한다.
• cosmid vector : 람다(λ) 염색체와 플라스미드의 잡종 핵산으로 만들어진다. 대장균 세포의 자율적 복제, 람다 파지 기원의 cos site, 알파(α) 염색체의 포장 능력을 모두 갖추고 있다.
• shuttle vector : 대장균과 진핵세포 같이 다른 두 종 사이에서 복제가 가능한 장점이 있다.
• YACs : 유전적으로 개발된 효모의 소염색채를 의미한다. 효모의 ARS(복제 원점), 동원체, telomere, 선별 지표, MCS를 갖는다. 수백 kb의 DNA 클로닝이 가능하다는 장점이 있다.
• BACs : 박테리아의 F요소(F factor)에서 제작된 것으로 큰 DNA의 클로닝이 가능하다. 대장균에서 복제가 가능하다.